ApoE基因分型检测应用及解决方案

ApoE基因编码载脂蛋白E (Apolipoprotein E) 参与体内脂质代谢、免疫调节和神经生理过程等功能。ApoE基因包含三种亚型,分别是ApoE2、ApoE3和ApoE4,并且该基因具有两个关键的SNP,即rs429358和rs7412,构成六种基因型。不同的ApoE基因亚型与不同疾病之间存在一定的关联,也为临床诊断提供更广阔的思路与方向。

 

01

阿尔茨海默病 (AD) 的预防及辅助诊断

对于ApoE基因分型的检测,可用于阿尔茨海默病发生与转化风险的预测,其中ApoE4是阿尔茨海默病症的高风险基因。携带1个ApoE ε4者发生AD的风险会增加约3~4倍,携带2个ApoE ε4者发生AD的风险会增加约10~15倍。

02

心脑血管疾病的预防及辅助诊断

ApoE基因与胆固醇代谢和心血管疾病风险有关,携带ApoE ε2和ApoE ε4可能对心脏病和中风有不同程度的风险,其同时也是动脉粥样硬化的风险基因。

03

他汀类药物的用药指导

他汀类药物是应用最广泛的降脂药,患者在服用他汀类药物时,其临床疗效与不良反应存在较大的个体差异。

ApoE基因在一定程度上会影响他汀类药物的降脂疗效,比如对于携带ApoE ε4的患者,他汀类药物的降脂效果可能较差。因此,根据ApoE基因型制定个体化治疗方案时,需选择更适合的他汀类药物种类和剂量。

 

Medix Biochemica高品质分子诊断原料,基于荧光定量PCR技术,可提供针对熔解曲线、等位基因特异性PCR等方法的酶,为ApoE基因分型提供准确、高效的基础保障。

 

HiDi®

高效鉴别能力酶,等位基因特异性PCR金标准

 

等位基因特异性PCR,可在标准PCR条件下的单反应中,通过在等位基因特异性引物的3’末端引入碱基错配,高效区分SNP。

Medix Biochemica HiDi®系列产品,专门针对等位基因特异性PCR应用,具有超高效鉴别能力。对于引物3’末端仅单独一个错配,即具有高特异性,且无论是转换型或颠换型错配,均可高效鉴别 (图1)。

 

图1. HiDi® 2x PCR Master Mix与其他供应商在ARMS-PCR应用中的对比

 

图A:引物设计,其中 “ 野生型匹配引物;

图B, C:HiDi® 2x PCR Master Mix对于仅3’末端单独的转换型或颠换型错配,其错配引物延伸均有明显循环滞后。

 

以 100bp 长度片段的肌动蛋白 (Actin) 基因 (Genbank NM_001101.5) 为靶基因进行扩增,10 倍梯度稀释人基因组为模板 (50000, 5000, 500, 50 和 5 DNA拷贝数),并分别设定 3 个复孔。

HiDi® 2x PCR Master Mix: 采用任何一种错配引物均可高效地完成突变位点的鉴别。

供应商 A: 采用任何一种错配引物均无法进行突变位点的鉴别。

供应商 B: 采用任何一种错配引物均无法进行突变位点的鉴别,并且扩增表现不佳。

供应商C: 采用任何一种错配引物均无法进行突变位点的鉴别,扩增表现不佳并且产生荧光信号值更低。

  • 独特的工程化聚合酶,具有高效鉴别能力 (High Discrimination);

  • 灵敏度可至 104 个拷贝野生型基因背景中,检测到小于 10 拷贝突变;

  • 可高效鉴别引物3’末端的单碱基转换或颠换型错配。

货号

产品名称

#4200

HiDi® Taq 2x PCR Master Mix (探针法)

#9201

HiDi® Taq DNA polymerase (探针法)

#9001

HiDi® DNA polymerase (染料法)

#9101

HiDi® 2x PCR Master Mix (染料法)

 

 

 

Plextaq®

多重qPCR,强耐受能力、可冻干

 

独特的DNA聚合酶为多重qPCR反应提供了高灵敏度和特异性能,DNA 模板浓度由10,000至10拷贝/反应进行梯度稀释,经冻干后的Plextaq® 检测灵敏度可至10拷贝/反应,并且确保了不同检测靶标结果的均一性 (图2)。

 

图2. 经冻干后的PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix用于多重qPCR检测

  • 5倍浓度预混液,为多重检测需求提供更多优化空间;

  • 稳定且高效多重反应,可至30重多靶点扩增;

  • 强耐受能力,可省略样本核酸提取步骤,支持粗样本直扩;

  • 适配体热启动配方,快速启动功能并减小错误率;

  • 可冻干形式,包含所有冻干所需辅料,更加便捷地满足冻干需求。

货号

产品名称

规格

#1101

Taq DNA Polymerase Hot-Start 

400/4000 U

#4000

PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix

100/500 Reactions

 

 

 


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