人类白细胞抗原 (human leukocyte antigen, HLA) 又称移植抗原，与同种异体组织器官移植以及移植物的排斥反应相关。而 HLA 组织配型是影响器官移植、造血干细胞移植存活率及受者生存质量的重要因素之一。
HLA 基因具有高度的多态性，决定了所表达的 HLA 抗原分子的多态性。目前主要利用基因分型检测技术进行 HLA 分型，相较于血清学和细胞学方法，具有更高的灵敏度和准确度，并且可以检测出更多分型。
针对聚合酶链反应-序列特异性引物 (polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP) 的 HLA 基因分型检测方法，Medix Biochemica HiDi® 系列原料酶对于引物 3' 末端仅单独一个错配，即具有高特异性，且无论是转换型或颠换型错配，均可高效鉴别，极大程度提高了 HLA 基因分型的效率、灵敏度和准确性。
图1. PCR-SSP 方法应用实例 (HiDi®DNA polymerase, Medix Biochemica)
Hela 细胞中提取 gDNA 为模板 (1 ng/µl模板浓度)，分别针对 C-等位基因和 A-等位基因设计引物序列 (图1A)，使用 HiDi® DNA polymerase 分别进行扩增。
实验表明：C-等位基因特异性引物可有效扩增产物，而 A-等位基因特异性引物几乎没有扩增产物 (图1B)，并通过熔解曲线分析同时被证实 (图1C)。通过琼脂糖凝胶电泳分析其有效扩增产物长度约 109 bp，达到高效鉴别特异性基因目的。
◆ 独特的工程化聚合酶，具有高效鉴别能力 (High Discrimination) ；
◆ 灵敏度可至 104 个拷贝野生型基因背景中，检测到小于 10 拷贝突变 ；
◆ 可高效鉴别引物 3' 末端的单碱基转换或颠换型错配 ；
◆ HLA 基因分型、甲基化检测、 CRISPR 等广泛的应用场景。
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货号 |
产品名称 |
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HiDi® Taq 2x PCR Master Mix (探针法) |
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HiDi® Taq DNA polymerase (探针法) |
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HiDi® DNA polymerase (染料法) |
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HiDi® 2x PCR Master Mix (染料法) |
基于直接测序法 (sequence-based typing, SBT) 的 HLA 基因分型检测，是一种可靠的 HLA 基因分型方法，可准确确定新的 HLA 等位基因。
Medix Biochemica PlexTaq 系列原料酶，其独特的 DNA 聚合酶确保了多重扩增反应的高特异性能，为后续测序进行 HLA 分型检测提供强有力的保障。
图2. PlexTaq®5x qPCR Multiplex Master Mix 用于多重qPCR
经冻干的 PlexTaq®5x qPCR Multiplex Master Mix 用于扩增检测病原样本的三个靶点及对照实验，其样本设置 4 组浓度梯度，每组 2 个复孔。
◆ 稳定且高效多重反应，可至 30 重多靶点扩增；
◆ 无基因偏好，均匀扩增基因；
◆ 适配体热启动配方，快速启动功能并减小错误率；
◆ 可省略样本核酸提取步骤，支持粗样本直扩，更快获得可靠结果；
◆ 可冻干形式，包含所有冻干所需辅料，更加便捷满足冻干需求。
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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Taq DNA Polymerase Hot-Start |
400/4000 U |
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PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix |
100/500 Reactions |
参考资料：《人类白细胞抗原基因分型检测体系技术标准》
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