Volcano3G® 是 Medix Biochemica 品牌旗下分子诊断系列之一的原料，单支即用型预混液，其核心的工程化聚合酶兼具反转录活性，具有极高的耐热性及稳定性，可用于 DNA 或 RNA 样本的 (RT)-qPCR 检测。
省时 ➟ 可至零步法 RT-qPCR (不含单独反转录程序步骤)，更快获得检测结果；
省力 ➟ 单支全预混型原料，可用于粗样本直扩；
省成本 ➟ 双功能酶且无需特殊条件激活；
其他 ➟ 实力耐高温，超强稳定性。
Volcano3G® 可达到 95℃ 半衰期 >40min，具有极高的耐热性。以 RNA 类样本为例，在 45~95℃ 温度范围内依然保持高效的 RNA 反转录和 DNA 扩增效率 (图 1)。
在 RT-qPCR 过程中，较高的反转录温度有助于减少靶基因中形成的 RNA 二级结构，提高检测特异性及灵敏度，整体提升反应性能。
图1. Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (#6101) 高达95°C热稳定性
实验组：Volcano3G®、供应商B、C试剂，于45~95℃加热15min后，用于SARS-Cov-2为样本的RT-qPCR检测，得到实验组Cq值。
对照组：Volcano3G®、供应商B、C试剂，用于SARS-Cov-2为样本的RT-qPCR检测，得到对照组Cq值。
Cq (对照组) - Cq (实验组) =ΔCq，增加的ΔCq值则表明在恒定模板量前提下发生延迟或没有扩增。
供应商B (绿色)、C (橙色) 经过高温处理后，增加的ΔCq表明在恒定模板量前提下发生延迟或没有扩增，而Volcano3G® (黑色) 经过高温后依然保持高效酶活性，具有更优的热稳定性。
基于 Volcano3G® 的耐高温属性，采用高温反转录一步法 RT-qPCR (70°C 反转录步骤温度)，可达到 RNA 2.5 拷贝/反应的灵敏度。
相较于其他供应商常规一步法 RT-qPCR (50°C 反转录步骤温度)，应用 Volcano3G® 的反应结果更加稳定，并且 RT-qPCR 的反应灵敏度更高 (图 2)。
图2.Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (#6101) 高温反转录RT-qPCR反应，和其他供应商常规一步法RT-qPCR反应灵敏度的对比
Volcano3G® 预混液中的酶成分，和其他供应商的 Taq DNA 聚合酶，同时在21°C条件下过夜后进行反应测试，Volcano3G® 中的酶活性相对稳定，反应信号强度及灵敏度均未受影响 (图 3)。
图3. Volcano3G® 酶成分和其他供应商Taq DNA聚合酶的常温稳定性表现对比
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix |
100/500 reactions |
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye) |
100/500 reactions |
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